На заседании Диссертационного совета Д 001.007.01 защищена диссертация А.М.Лящука "Получение и характеристика рекомбинантного белка TUL4, потенциального компонента генно-инженерной субъединичной противотуляремийной вакцины", представленная на соискание ученой степени кандидата биологических наук по специальностям 03.00.07 - микробиология и 03.00.03 - молекулярная биология.
Работа выполнена в НИИ эпидемиологии и микробиологии им.Н.Ф.Гамалеи РАМН.
Научные руководители - доктор биологических наук И.С.Мещерякова и кандидат биологических наук В.Г.Лунин.
Официальные оппонентыами выступили профессор В.М.Бондаренко и кандидат биологических наук В.Е.Алаторцев.
В заключении Диссертационного совета отмечено, что работа А.М.Лящука является научным квалификационным исследованием, в котором на основе технологии целлюлозосвязывающих доменов для генно-инженерных субъединичных противотуляремийных вакцинных препаратов получен в препаративных количествах и охарактеризован высокоочищенный рекомбинантный белок TUL4-sp-CBD, потенциальный компонент генно-инженерной субъединичной противотуляремийной вакцины.
В ходе выполнения исследования, для обеспечения синтеза белка TUL4 в клетках E.coli, сконструированы гибридные плазмиды, контролирующие синтез химерных белков TUL4-sp-CBD и СBD-sp-TUL4. Данные белки состоят из нуклеотидной последовательности зрелого белка, спейсера и целлюлозосвязывающего домена. Они различаются N- и C-концевым расположением последовательности белка TUL4.
Получены бактериальные продуценты белка TUL4 в составе химерных белков TUL4-sp-CBD и СBD-sp-TUL4. Разработана эффективная схема очистки этих белков на целлюлозе, обеспечивающая чистоту препаратов более 95%.
Установлено, что препарат, содержащий комплекс TUL4-sp-CBD и целлюлозу, индуцирует выработку у лабораторных животных специфических антител к исследуемому белку.