А.Л.Зимин "Разработка метода специфической детекции и видовой дифференциации возбудителей хламидиозов на основе структурного полиморфизма гена omp2" - к.б.н.

28 ноября 2003 г.

На заседании Диссертационного совета Д 001.007.01 защищена диссертация Т.И.Карповой "Идентификация и типирование Listeria monocytogenes на основе особенностей полиморфизма и экспрессии генов факторов патогенности", представленная на соискание ученой степени кандидата биологических наук по специальности 03.00.07 - микробиология.

Работа выполнена в НИИ эпидемиологии и микробиологии им.Н.Ф.Гамалеи РАМН.

Научный руководитель - доктор биологических наук, профессор И.С.Тартаковский.

Официальными оппонентами выступили профессора В.М.Бондаренко и М.Н.Бойченко.

Ведущая организация - Российская медицинская академия последипломного образования Минздрава РФ.

В заключении Диссертационного совета отмечено, что работа Т.И.Карповой является научным квалификационным исследованием, в котором разработаны новые методы идентификации и типирования Listeria monocytogenes на основе изучения особенностей полиморфизма и экспрессии генов факторов патогенности. Эти методы включены в официальную систему оценки микробиологической безопасности продуктов питания. Их использование существенно повышает эффективность контроля продуктов питания в отношении патогенных листерий. При оценке уровня контаминации продуктов питания листериями выявлено их присутствие в 29,6% исследованных продуктов, из них в 8% случаев определялся возбудитель листериоза L.monocytogenes.

Разработан принципиально новый метод идентификации L.monocytogenes, основанный на выявлении индукции лецитиназной активности в присутствии активированного угля. С помощью этого метода продемонстрирована возможность быстрой и достоверной дифференциации L.monocytogenes от непатогенных листерий, выделяемых из продуктов питания.

Показано, что наиболее эффективным и надежным способом дифференциации L.monocytogenes от непатогенных листерий в настоящее время является сочетание лецитиназного теста и полимеразной цепной реакции с видоспецифическими праймерами plc1 и plc2.

На основе оценки полиморфизма длин рестрикционных фрагментов выявлено существование у вида L.monocytogenes двух филогенетических линий: типа А и типов В и В1. Показано преобладание среди пищевых изолятов - штаммов, относящихся к первой линии (72%), в то время как среди клинических изолятов преобладали штаммы, относящиеся ко второй линии (67%).